一、實驗介紹
在真核生物中發(fā)現(xiàn)的具有調(diào)控功能的內(nèi)源性非編碼RNA,大小約20-25個核苷酸,我們根據(jù)成熟miRNA序列信息,合成含有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的前體miRNA連接至測翼序列的表達(dá)在體中,將其轉(zhuǎn)染/病毒包裝感染進入細(xì)胞後,由II型啟動子(CMV)啟動表達(dá),經(jīng)核酸酶的剪切加工,組裝RNA誘導(dǎo)的沉默複合體,通過鹼基互補配對的方式識別靶mRNA,並根據(jù)互補程度的不同指導(dǎo)沉默複合體降解靶mRNA或者阻擋mRNA的翻譯
二、實驗週期
25-30工作日
三、交付標(biāo)準(zhǔn)
慢病毒抑制載體構(gòu)建,慢病毒包裝與純化,滴度測定
四、客戶提供
miRNA序列信息
五、實驗流程
合成pre-miRNA序列 連接至miRNA表達(dá)載體 挑選陽性克隆測序驗證
慢病毒包裝 構(gòu)建miRNA慢病毒表達(dá)載體 慢病毒包裝 滴度檢測
腺病毒包裝 構(gòu)建miRNA腺病毒表達(dá)載體 腺病毒包裝 滴度檢測