一、實(shí)驗(yàn)介紹
細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率,表示接種細(xì)胞後貼壁的細(xì)胞存活並形成克隆的數(shù)量,貼壁後的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細(xì)胞,必是貼壁和有增值活力的細(xì)胞,克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增值能力二個(gè)重要性狀
二、實(shí)驗(yàn)週期
8-10工作日
三、交付標(biāo)準(zhǔn)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果、克隆形成率的數(shù)值和分析
四、客戶提供
樣品信息(包括來源、全稱等)、生長狀況良好的宿主細(xì)胞株(可以是凍存的),並提供細(xì)胞特性、培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項(xiàng)
五、實(shí)驗(yàn)流程
平板克隆形成(適用於貼壁細(xì)胞、正常培養(yǎng)細(xì)胞)
單細(xì)胞混懸液制備 細(xì)胞接種 觀察克隆 Giemsa染色 計(jì)算克隆形成率
軟瓊脂克隆形成(適用於懸浮細(xì)胞、非依賴生長細(xì)胞)
單細(xì)胞混懸液制備 底層瓊脂制備 上層瓊脂制備 細(xì)胞培養(yǎng)及觀察 計(jì)算克隆形成率