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氯化硝基四氮唑藍（NBT）常與5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸（BCIP）聯(lián)合組成堿性磷酸酶的NBT/BCIP檢測系統(tǒng)，

其檢測原理即在堿性磷酸酯酶的催化下，BCIP首先被水解去除磷酸基團產(chǎn)生強反應性的中間產(chǎn)物，

然后進一步氧化和二聚合產(chǎn)生一種靛青染料（indigo dye）。

而二聚合反應中產(chǎn)生的兩個還原當量（-2H）能夠還原NBT形成不溶性的NBT-formazan，呈深紫色或者藍紫色。

這種檢測系統(tǒng)無需額外檢測設備，檢測結(jié)果清晰可見，常用于細胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色，

包括誘導多功能干細胞iPS的鑒定，Western/Northern/Southern Blot等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜上的

顯色檢測，原位雜交以及免疫組化實驗等。

本品溶于水或者甲醇，可直接用去離子水配成10 mg/ml的儲存液，于4℃短期或者-20℃長期避光保存。

NBT脫氫酶和其它過氧化酶的底物。

用于測定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase）；

也是凝血因子I（fibrinogen）的沉淀試劑。

也是堿性磷酸酶底物之一，在堿性磷酸酶的催化下生成不溶性的藍色產(chǎn)物。

常用于免疫組化(IHC)、免疫細胞化學(ICC)和蛋白印跡(WB)等實驗。

NBT經(jīng)常和BCIP聯(lián)合使用檢測堿性磷酸酶的活性。

這個反應是NBT將吲哚酚氧化形成靚藍色的不可溶物，

NBT 也被用于其它反應的氧化還原指示劑，包括脫氫酶，蘇氨酸脫氨酶，

葡糖糖-6-磷酸脫氫酶，磷酸果糖激酶。

NBT也被用為血液樣品中細菌感染的色度指標。