使用異硫氰酸胍溶液需要現(xiàn)配嗎?
答:提取試劑基于4M硫氰酸胍的終濃度:4mM檸檬酸鈉,0.83%N-月桂基肌氨酸(十二烷基,N-甲基甘氨酸鈉),0.2mMβ-CSB緩沖溶液由巰基乙醇制得;混合25 g異硫氰酸胍和33 mL CSB緩沖溶液直至完全溶解,并將溶液在65°C加熱以制備變性溶液,將其在4°C下儲(chǔ)存直至使用。
因此,不必立即使用異硫氰酸胍溶液,目前市場(chǎng)上有不同濃度的溶液,但長(zhǎng)時(shí)間放置并不容易,否則會(huì)沉淀并需要仔細(xì)檢查。使用此外,如果一次準(zhǔn)備太多,建議分裝。
異硫氰酸胍溶液準(zhǔn)需要滅菌嗎?
答:異硫氰酸胍溶液無(wú)需滅菌。該溶液不是很穩(wěn)定,通常將0.1%DEPC水用作裂解液。水已經(jīng)消毒了。另外,在制備試劑時(shí),所有用于RNA提取的試劑都需要用DEPC水制備,并且優(yōu)選重新打開試劑并將其專用于RNA。
盡管無(wú)需對(duì)制備的裂解物進(jìn)行滅菌,但應(yīng)注意的是,實(shí)驗(yàn)中使用的塑料產(chǎn)品已標(biāo)記為無(wú)Rnase。如果未在未打開的程序包中使用過它們,則可以直接使用它們,而所有其他則必須通過。處理:將DEPC加到雙蒸餾水中至終濃度為0.1%,將塑料產(chǎn)品浸泡,然后將廚房通風(fēng)過夜,然后用鋁箔密封,在高溫下高壓滅菌至少30分鐘,然后高壓干燥,然后再干燥用。
異硫氰酸胍的毒性?
答:異硫氰酸胍的吸入,食入和皮膚接觸可能會(huì)造成損害,因此在操作過程中需要穿戴實(shí)驗(yàn)室衣服,手套和護(hù)目鏡。與酸接觸時(shí)會(huì)釋放出劇毒的氣體,對(duì)水生生物有害。有害,可能對(duì)水環(huán)境產(chǎn)生長(zhǎng)期不利影響,因此應(yīng)避免釋放到環(huán)境中。