TBE 緩沖液是生物學(xué)中常使用的核酸電泳緩沖鹽溶液,主要用于 DNA 的瓊脂糖凝膠電泳。
TBE 的主要成分是 Tris-硼酸鹽與 EDTA,緩沖能力強,適合較長時間電泳,分辨率較高,
電泳小于 1kb 的片段時分離效果好。
TBE 緩沖液中的硼酸成分會影響 DNA 回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng),若要進行 DNA 片段的
瓊脂糖凝膠電泳回收實驗,建議使用 TAE 緩沖液。
本產(chǎn)品為 5×濃縮液,工作濃度為 0.5×,可直接用蒸餾水稀釋 10 倍后使用。
產(chǎn)品為5x 儲液,包含0.445 M的Tris 硼酸鹽(pH 約為8.3),以及0.01 M 的EDTA。
是由雙蒸水配制而成,并經(jīng)0.45 μm 濾膜過濾。
建議電壓要低于5 V/cm 以獲得最好的分辨率。
TBE buffer 電泳跑出的條帶較清晰,但是TBE在水中的溶解度較低,
室溫放置buffer容易析出沉淀,如果有沉淀析出,可加熱溶解后繼續(xù)使用。
TBE電泳緩沖液是DNA或是RNA聚丙烯酰胺凝膠電泳中最常用的的緩沖液。
TBE可以在非變性膠以及變性膠(7 M 尿素)中使用。
TBE也在DNA測序凝膠中經(jīng)常使用,也可用于瓊脂糖凝膠,
但對于需要回收的核苷酸片段并不建議使用。
TAE和TBE緩沖液的比較
TAE緩沖液:
成分:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA
優(yōu)點:超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子 緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用。質(zhì)量電泳大于 13kb 的片段時分離效果好,可用于回收 DNA 片段。
缺點:緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用。
TBE緩沖液:
成分:45mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA
優(yōu)點:緩沖能力強,適合較長時間電泳,分辨率較高,電泳小于 1kb 的片段時分離效果好。
缺點:緩沖液中的硼酸成分會影響 DNA 回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng)實驗。