Western-Mate是在化學(xué)發(fā)光顯色之后用于膜的再生。
實驗步驟如下:
1. 待膜化學(xué)發(fā)光檢測后,用DDH2O進行漂洗,棄DDH2O
隨后加入Western-Mate 。
2. 室溫孵育1-3分鐘(無需4℃環(huán)境下進行孵育)。
3. 用大量雙蒸水洗膜。
4. 再用PBST/TBST(Tween20濃度為0.05%)洗膜三次,每次5分鐘。
5. 膜洗凈后即可依需要進行原來抗體或其他抗體再次孵育。
Western-Mate適用于PVDF膜和硝酸纖維素膜;
Western-Mate適用于辣根過氧化物酶HRP-ECL發(fā)光一抗二抗的洗脫
但堿性磷酸酶AP-NBT/BCIP顯色法不適用于本試劑。
Western Blot 實驗。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。
即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費性步驟。
而且可以消除重新上樣而帶來的誤差, 使可比性更強。
Western Blot膜再生液特點是:
無毒無味無害,室溫下使用,室溫下保存;可對同一張膜進行Western Blot 檢測。
適用:清除硝酸纖維素膜或 PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。