科研試劑,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面。本品為第三代頭孢菌素類抗生素。
對(duì)大腸埃希菌、肺炎桿菌等腸桿菌科細(xì)菌和流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌等有高度抗菌活性。對(duì)硝酸鹽陰性桿菌、產(chǎn)堿桿菌等亦有良好抗菌作用。
對(duì)于細(xì)菌產(chǎn)生的大多數(shù)?內(nèi)酰胺酶高度穩(wěn)定,故其對(duì)上述革蘭陰性桿菌中多重耐藥菌株仍可具抗菌活性。
肺炎球菌、溶血性鏈球菌等革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)本品高度敏感,但本品對(duì)葡萄球菌僅具中度活性,腸球菌和耐甲氧西林葡萄球菌則往往對(duì)本品耐藥。
本品對(duì)消化球菌和消化鏈球菌等厭氧菌具一定抗菌活性,但對(duì)脆弱擬桿菌抗菌作用差。
其作用機(jī)制為與細(xì)菌細(xì)胞膜上的青霉素結(jié)合蛋白(PBPs)結(jié)合,使轉(zhuǎn)肽酶?;种萍?xì)菌中隔和細(xì)胞壁的合成,影響細(xì)胞壁粘肽成分的交叉連結(jié)使細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)受到抑制,
細(xì)菌形態(tài)變長(zhǎng),最后溶解和死亡。
植物愈傷實(shí)驗(yàn)時(shí)常見(jiàn)問(wèn)題:
1. 侵染時(shí),懸浮培養(yǎng)基里不要接太多的農(nóng)桿菌,
2、愈傷在農(nóng)桿菌懸浮培養(yǎng)基里放置時(shí)間最好為15-30分鐘,不要太長(zhǎng),特別是對(duì)于粳稻,更是沒(méi)有必要時(shí)間太長(zhǎng)。
3、水洗共培養(yǎng)的愈傷后加適量CN(羧芐青霉素二鈉,濃度為233.69mg/ml)靜置30分鐘,
4、篩選培養(yǎng)基上加450-500ul以上濃度的CN每250ml培養(yǎng)基
5、更重要的是共培養(yǎng)的溫度應(yīng)該在19-21度之間為最好
6、培養(yǎng)時(shí)間不超過(guò)72小時(shí),當(dāng)然如果看到農(nóng)桿菌長(zhǎng)起來(lái),就要馬上洗了
7、因?yàn)楣才囵B(yǎng)的培養(yǎng)基PH值一般比較低(5.4-5.6),所以有點(diǎn)濕,這就更要求要仔細(xì)認(rèn)真的做。
右圖為MDBio與Sigma Cefotaxime抑菌效果比較
用於抑制農(nóng)桿菌,研究了MS培養(yǎng)基中不同濃度頭孢噻肟鈉(Cefotaxime sodium)、羧芐青霉素(Carbenicillin)和特美汀(Timentin)
3種抑菌劑對(duì)發(fā)根農(nóng)桿菌的抑制效果及對(duì)茶樹(shù)組培苗叢生芽的影響。
結(jié)果顯示,頭孢噻肟鈉和特美汀均可以有效抑制農(nóng)桿菌LBA9402、15834,而15834在羧芐青霉素的板上17 d內(nèi)長(zhǎng)出;對(duì)于外植體,
頭孢噻肟鈉和羧芐青霉素都顯著降低了茶組培苗的叢生芽增殖率,且畸形苗率高;當(dāng)特美汀質(zhì)量濃度在400mg·L-1以下時(shí),對(duì)茶組培苗影響較小,
與正常對(duì)照無(wú)顯著差異,特美汀具有作為茶樹(shù)遺傳轉(zhuǎn)化體系中抑菌劑的潛力。