二甲基亞砜(DMSO),常溫下為無色無臭的透明液體,是一種吸濕性的可燃液體,被譽為“萬能溶劑”。
許多不直接溶于水的化合物可以用二甲基亞砜溶解,形成濃縮儲備溶液,使用時可在水性緩沖液或培養(yǎng)
基中進一步稀釋至所需的最終濃度。
DMSO常用于PCR相關(guān)的許多實驗。在細胞培養(yǎng)中,常作為細胞、組織和器官的玻璃化低溫冷凍防護劑,
可以保護細胞免受冰晶引起的機械性損傷。
也可以用于主培養(yǎng)、亞培養(yǎng)、重組異倍體、雜交瘤等系列細胞株,胚胎干細胞(ESC)和造血干細胞的
冷凍保藏。
DMSO常與BSA或FBS混合使用。
在PCR反應體系中加入10%的DMSO(二甲基亞砜),可以減少模板的二極結(jié)構(gòu),甲酰胺及氯化四甲基胺均可提高反應的特異性。
低濃度的NP-40(0.05%)和Tween-20(0.05%)能增強Taq DNA聚合酶的活性。
低濃度SDS對該酶的抑制作用可加入一定濃度的NP-40和Tween-20抵消。
DMSO可以提高PCR的特異性,幫助擴增一些難擴的模板。但要摸索,量大的話會抑制擴增,而且最好用于擴增1KB以上模板。