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①選取的RNA序列不對;
②樣品中沒有表達互作的蛋白質(zhì)。
③互作蛋白濃度低,銀染圖肉眼觀察不到差異條帶。
④其他
更多建議:
①lncRNA序列前期驗證要完善;
②選擇相應蛋白質(zhì)表達量較高的組織或細胞樣品;
③體外轉錄選擇轉錄質(zhì)量高的試劑盒,操作過程避免Rnase的污染;
④保證RNA Pull-down實驗中探針標記以及探針與蛋白的結合充分進行(依據(jù)體外轉錄RNA的量,樣品裂解液蛋白濃度);
⑤盡可能多將洗脫的蛋白電泳(同時可以避免顯色時間過長)
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